一种植物提取物总酚含量测定方法 |
发布时间:2019-08-21 信息来源:admin 发布人:admin 点击次数:4156 |
一种植物提取物总酚含量测定方法 仪器 紫外-可见分光光度计、分析天平、低速离心机、恒温水浴锅、粉碎机、pH计、超声波提取器、回流装置、10 mL具塞试管、25 mL具塞三角瓶、250 mL容量瓶 药品 没食子酸标准品100mg、无水碳酸钠500g、福林酚试剂100 mL 实验步骤 (一)、标准曲线绘制 精确称量没食子酸标准品25 mg,用水溶解后定容于250 mL容量瓶中,得到0.1 mg/mL的标准贮备溶液。分别移取没食子酸标准储备溶液0.00、0.25、0.50、0.75、1.00、1.25、1.50 mL置于10 mL具塞试管中,分别加入福林-酚试剂1 mL,摇匀后再分别加入质量分数12% Na2CO3溶液2 mL,用水定容至10 mL,摇匀。平行三组。室温下避光反应1 h后,在765 nm波长下测定吸光度。以没食子酸标准溶液的浓度为横坐标,以吸光度为纵坐标,制作标准曲线,研究表明,没食子酸含量在20~120μg 范围内与吸光度具有良好的线性关系。 (二)、样品总酚的提取以及样品总酚含量的测定 (以60%乙醇提取为例) 称取0.5g粉碎的样品于25 mL具塞三角瓶中,加入10 mL体积分数60%的乙醇溶液,搅拌均匀,在超声波提取器中75℃提取50 min。提取液以3000 r/min离心20 min,取上清液,量取提取液体积,采用福林-酚比色法测定样品提取液的总多酚浓度。 吸取1.00 mL总多酚提取液(稀释适当倍数)于10 mL具塞试管中,分别加入福林-酚试剂1 mL及质量分数为12%的碳酸钠溶液2 mL并用60%乙醇定容至刻度,在室温下避光反应1 h,在765 nm波长处测定样品的吸光度,试剂空白为参比(提取溶剂代替提取液),并根据工作曲线来计算提取液中总多酚含量。
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