金银花提取物绿原酸的测定方法 --上禾生物

依据 2020 版的《中国药典》，金银花主要活性成分指标是绿原酸和酚酸类总量，绿原酸是其主要有 效成分，其含量常用来作为控制金银花的质量的标准，它含量的多少是评判金银花质量好坏的重要指标 之一，故绿原酸含量检测数据的准确性尤为重要。绿原酸的检测方法多种多样，如分光光度法、薄层层 Open Access 雷滨瑜 等 DOI: 10.12677/tcm.2022.114093 654 中医学 析—紫外分光光度法、高效液相色谱法等方法，以筛选出优质的金银花种质资源，为金银花药材的质量 评价提供实验依据。 Figure 1. The structure of chlorogenic acid 图 1. 绿原酸结构

高效液相色谱法(HPLC 法)

龚菊梅等[1]采用高效液相色谱法同时测定金银花中绿原酸、新绿原酸和异绿原酸的含量，得出绿原 酸、新绿原酸和异绿原酸在 0.013~0.526 mg/mL 内呈良好线性关系(相关系数 r 为 0.9993)，且平均加样回 收率均 > 99%，证明了该方法可靠、稳定、重现性好，可作为金银花中绿原酸、新绿原酸和异绿原酸的 含量测定方法，表明新绿原酸、绿原酸可以作为金银花等级划分的参考指标。王玉洁等[2]以金银花为原 料，采用水浴加热辅助提取法同步提取金银花中的绿原酸与总黄酮，并采用高效液相色谱法进行含量测 定。基于单因素试验，以绿原酸与总黄酮含量的总评“归一值”为因变量，利用 Box-Behnken 响应面法 对液料比、提取时间、提取温度和乙醇体积分数进行优化。通过调整提取工艺条件，从金银花中提取绿 原酸与总黄酮的含量分别为 30.79、63.35 mg/g，得率分别为 3.08%和 6.34%。该方法简单、快速、灵敏， 可用于金银花中绿原酸和总黄酮含量的同时检测。

数码成像比色法

数码成像比色法是基于数码设备上获得的颜色数值完成定量分析的一种新方法，微流控纸芯片法是 当前微全分析系统发展的热点，以纸张为制作材质的纸质微流控芯片(简称纸芯片)，是一种新型微尺度分 析器件，利用特定材质在纸上制作疏水边界，将被测流体限定在预设的亲水区域内，引导流体流入检测 区与预加的反应剂进行接触反应。 孔京华[3]基于数码成像法的原理，利用绿原酸与三氯化铁发生显色反应的原理，制作绿原酸快速测 定纸芯片，并结合智能手机的数码成像功能，开发的一种纸基微流控数码成像法，为绿原酸含量快速测 定提供新的思路。乐薇等[4]基于数码成像法，利用荧光碳点的高灵敏度，结合分子印迹技术的高选择性， 制备了一种快速测定绿原酸含量的微流控纸芯片。该纸芯片成本低廉、选择性良好、检测速度快(20 min 内可完成)，可作为测定条件简陋、现场临时快速测定绿原酸含量的补充方法。上述纸芯片有以下优点， 分析速度极快，可在数秒或数十秒时间内自动完成测定、分离或其他更复杂的操作，分析和分离速度比 常规宏观分析法快一到两个数量级；试样与试剂消耗量极少，这既降低了分析费用和贵重生物试样的消 耗，也减少了环境污染，是绿色分析技术；便携且应用广泛，由于将微通道网络结构和其他功能单元集 成在一个几平方厘米的芯片上，因此易制成功能齐全的便携式仪器，用于各类现场分析。 传统检测所需使用到的仪器昂贵且检测所需耗材费用相对较高，对测定环境要求高且主要适合在实 雷滨瑜 等 DOI: 10.12677/tcm.2022.114093 655 中医学 验室进行检测，不适于现场的快速检测。基于这些因素限制了对绿原酸的进一步研究。

目前国内外都在 不断探索绿原酸的提取和合成方法，其成果也非常显著，这就对绿原酸的检测手段和方法有了更高的要求。

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