本方法采用高效液相色谱法测定双黄连片中绿原酸的含量。

本方法适用于中成药双黄连片。

本品加50%甲醇超声处理，放冷，补重，摇匀，滤过，续滤液进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外吸收检测器，于波长324nm处检测绿原酸的吸收值，计算出其含量。

1. 50%甲醇

2. 冰醋酸

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按绿原酸峰计算应不低于6000。

1.3 紫外吸收检测器

2色谱条件

2.1流动相：甲醇 水 冰醋酸 ＝15 85 1

2.2检测波长：324nm

2.3柱温：室温

1. 称取供试品

取装量差异项下的本品，研细，取约0.2g，精密称定，为供试品。

2. 对照品溶液的制备

精密称取绿原酸对照品适量，置棕色量瓶中，加50%甲醇制成每1mL含60mg的溶液。

3. 供试品溶液的制备

取装量差异项下的本品，研细，取约0.2g，精密称定，置50mL量瓶中，加50%甲醇适量，超声处理（功率250W，频率33kHz）20分钟，放置至室温，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取续滤液2mL，置10mL量瓶中，加50%甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶液。

分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10mL，注入高效液相色谱仪，用紫外吸收检测器于波长324nm处测定绿原酸（C₁₆H₁₈O₉）的峰面积，计算出其含量。

中华人民共和国药典，国家药典委员会编，化学工业出版社，2005版，一部，p406。