药材来源：大黄采自甘肃、四川、西藏.

方法：　

1.色谱条件：Hypersil ODS 柱(4. 6 mm ×250 mm , 5μm) 大连依利特公司生产, Kromasil ODS 保护柱(4. 6 mm×10 mm , 5μm) . 甲醇21. 0 %冰醋酸梯度流动相见表1. 温度25 ℃. 色谱峰光谱采集范围: 220～500nm;以大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素甲醚、芦荟大黄素为参照物检测波长430 nm.

2.对照品溶液的制备：分别精密称取大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄素

甲醚、芦荟大黄素对照品3. 710 、1. 840 、3. 630 、41175 、21060 mg , 用甲醇溶解定容至5. 0 mL. 制成浓度分别为0. 742 、0. 368 、0. 726 、0. 835 、0. 412 mg/ml 的对照品贮备溶液. 分别取大黄酸、大黄素、大黄酚、芦荟大黄素贮备溶液0. 1 mL , 大黄素甲醚0. 05 mL

混合,用甲醇定容于2 mL ,制成对照品溶液.

表1 　测定大黄指纹图谱的流动相

3.供试品溶液的制备：称取三依中文大黄药材粗粉0. 5 g ,用50 %丙酮水溶液超声提取2 次(30 min ,30 mL) ,过滤,滤液蒸干溶剂,残渣用50 %甲醇水溶液溶解定容至10 mL ,0145μm 膜过滤. 进样量10μL. 波长扫描范围220～500 nm.

4.测定：根据“供试品溶液的制备”测定，结果如图 (图1 ,图2) .