本方法采用高效液相色谱法测定烧伤灵酊中大黄素的含量。

    本方法适用于中成药烧伤灵酊。

1 甲醇

2 石油醚60～90°C

3 甲酸乙酯

4 甲酸

5 无水乙醇

6 磷酸溶液，0.1％

7 硅胶（色谱用，60～160目）

8 五氧化二磷

1 仪器

1.1 高效液相色谱仪

1.2 色谱柱

十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论塔板数按大黄素峰计应不低于2000。

1.3 紫外吸收检测器

2 色谱条件

2.1 流动相：甲醇 + 0.1％磷酸溶液 = 85 + 15

2.2 检测波长：254nm

2.3 柱温：室温

1.称取供试品

精密量取本品2mL。

2.对照品溶液的制备

取大黄素对照品（经五氧化二磷干燥过夜）适量，精密称定，加无水乙醇溶解，制成每1mL含0.01mg的溶液。

3.供试品溶液的制备

供试品置蒸发皿中，加硅胶1g，置温水浴上蒸干，移至硅胶色谱柱（2g，内径17mm，干法装柱），用石油醚－甲酸乙酯－甲酸（100：100：2）混合溶液90mL分次减压洗脱，收集洗脱液，置100mL量瓶中，并用混合溶剂稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。

注：“精密称取”系指称取重量应准确至所称取重量的千分之一。“精密量取”系指量取体积的准确度应符合国家标准中对该体积移液管的精度要求。