中华鳖(Trionyx sinensis)具有很高的营养和滋补价值。2O世纪80年代以来，不断扩大的市场需求刺激了养鳖业的迅猛发展。人工控温、高密度集约化的养殖方式改变了鳖的自然生活习性，导致其抗病能力减弱。与“野生鳖”(仿生鳖或池塘鳖)相比，温室鳖的肌肉品质发生了诸多变化。如肌肉胆固醇含量升高，蛋白质、风味氨基酸、必需氨基酸、肌肉感官色度，裙边的食用黏度、总胶原蛋白和可溶性胶原蛋白含量降低，肝脏质量和四肢脂肪沉积增加等。]。野生鳖品质虽好，但因其生长缓慢，价格昂贵。有鉴于此，能否通过营养途径提高“野生鳖”的生长性能并进一步改善其营养价值，值得深入研究。

中草药是我国传统医学数千年证明的中华瑰宝，具有天然、高效、毒副作用小，资源丰富等特点，同时兼具药用和营养双重作用。绿原酸(chloro— genic acid，CGA)是许多中草药如杜仲、金银花和茵陈等的主要有效成分之一，具有清除自由基、抗菌消炎、抗病毒、降糖、降脂、保肝利胆等多种功效。已有研究表明，杜仲能增强机体免疫力和抗氧化能力，改善动物生产性能_4。作为杜仲主要药效成分之一的绿原酸，在中华鳖上的研究与应用迄今未见报道。本试验拟探讨自然温度条件下绿原酸对人工养殖中华鳖增重率、裙边比和体脂比，裙边和肌肉胶原蛋白含量，肌肉水分、粗蛋白质、粗脂肪和胆固醇含量，以及血浆超氧化物歧化酶(superoxide dis． mutase，SOD)、过氧化氢酶(catalase，cAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase，GSH．Px) 的影响，为利用营养调控手段增强中华鳖抗氧化能力并提高其生产性能，促进中华鳖的健康养殖提供依据。

1 材料和方法

1．1 试验动物与日粮

试验鳖购于四川省泸州市西南化工研究设计院生物技术研究所。购回的中华鳖饲养于容积为 60 cm×45 cm×45 cm 玻璃缸中，每缸随机投放4 只，水深15 cm，自然水温(15~29℃)。每天16：00 定时排污，排污后喂食。饲粮选用四川通威集团生产的181甲鱼配合饲粮(表1)。用温水将饲粮揉和成团，揉搓成1～2 cm 的长条，以2％投食率定量投喂在缸中水泥食台上。在此条件下驯养2周后开始试验，试验时间为60 d。

1．2 试验设计

选择平均体重为(140．78±24．18)g的健康中华鳖160只，随机分成5组(A组～E组)，每组32 只，设4个重复，每个重复8只(将8只鳖随机分投放于2个玻璃缸中，每缸4只)。在基础饲粮中分别添加0(A组)、100(B组)、200(C组)、400(D组)和 800 mg／kg(E组)绿原酸。饲喂60 d后将各组鳖称重，计算增重率。断头取血，0．5％肝素钠抗凝， 2 000 r／min离心10 min制备血浆，测定血浆SOD、 CAT和GSH—Px。剪下裙边，解剖取四肢脂肪体和四肢腿部肌肉，分别测定裙边比、体脂比，裙边和肌肉胶原蛋白含量，肌肉水分、粗蛋白质、粗脂肪和胆固醇含量。

1．3 主要试剂

绿原酸(产品纯度98％)购于成都农兴生物科技有限公司；GSH—Px、SOD、CAT、羟脯氨酸和胆固醇检测试剂盒购于南京建成生物工程研究所。

1．4 测定指标与方法

增重率(％)=(试验末重一试验初重)X 100／试验初重；体脂比(％)=四肢脂肪体重×100／体重；裙边比(％)=裙边重X 100／体重。肌肉水分含量的测定：采用105℃烘干失重法测定n。 ；粗脂肪含量的测定：索氏抽提法_】。 ；粗蛋白质含量的测定：采用凯氏定氮法口。；GSH．Px、SOD、 CAT、羟脯氨酸和胆固醇检测按试剂盒说明书进行。GSH．Px单位为活力单位，其定义为0．1 mL血浆在37 ℃ 反应5 rain使反应液中GSH 降低 1~mol／mL为1个活力单位。

1．5 数据处理和统计分析

试验结果用“平均值±标准差”表示，采用SPSS 13．0软件进行数据分析和统计，先对数据作单因素方差分析(ANOVA)，若组间差异显著，再用Dun． can氏多重比较，P<0．05表示差异显著，P<0．01 表示差异极显著。

2 结果与分析

2．1 绿原酸对中华鳖生产性能的影响

由表3可知，在饲粮中添加绿原酸对中华鳖的生长具有明显的促进作用，其中c组的增重率显著高于对照组(A组)(P<0．05)，各试验组(B组～E 组)问无显著差异(P>0．05)。各试验组之间或各试验组与对照组之间的裙边比、体脂比、肌肉水分和肌肉粗脂肪含量无显著差异(P>0．05)，但裙边比有增大的趋势。各试验组裙边胶原蛋白含量均显著高于对照组(P<0．05)，C组、D组和E组与对照组达到极显著差异水平(P<0．01)。对于肌肉胶原蛋白含量，c组和D组显著高于对照组(P<0．05)，但B 组和E组与对照组无明显差异(P>0．05)。D组肌肉粗蛋白质含量显著高于对照组(P<0．05)。C组和 D组肌肉胆固醇含量均显著低于对照组(_P<0．05)。

2．2 绿原酸对中华鳖抗氧化能力的影响由表4可知，C组和D组GSH．Px活性显著或极显著高于对照组(Pc<0．05，P。<0．01)，B组和 E组与对组照无明显差异(P>0．05)。B组和C组 SOD活性极显著高于对照组(P0．05)。对CAT活性，仅c组极显著高于对照组(P<0．01)，B组、D 组和E组与对照组无显著差异(P>0．05)。总体上看，中华鳖血浆几种抗氧化酶(GSH．Px、SOD和CAT)的活性都呈现出随绿原酸添加剂量的增加而先升高后降低的规律，但添加高剂量的绿原酸(800 mg／kg)进行为期60 d的试验(E组)后，这几种抗氧化酶的活性仍高于对照组(P>0．05)

3 讨论

目前，大部分报道集中于杜仲及其提取物对动物生产性能的影响。添加4％ 杜仲叶粉、0．15％ 杜仲纯粉可显著提高草鱼的增重率(P< 0．05) ；添加0．15％杜仲叶提取物显著提高了异育银鲫对营养物质的消化率(P<0．05)，并促进其生长(P> 0．05)l7 ；添加4％或6％ 杜仲叶粉可显著促进鲤鱼的生长(P<0．05)_g ；添加1 500 mg／kg杜仲提取物对奥尼鱼生长也有显著的促进作用(P< 0．05)l】 。而有关绿原酸对水产动物生产性能的影响还未见报道。因试验期间水温较低(15～29℃)，虽投喂人工配合饲粮，中华鳖的生长速度也远低于人工控温养殖的水平口。但各试验组的增重率均高于对照组(P>0．05)，其中C组的增重率与对照组达到了显著差异的水平(P<0．05)，证实绿原酸 对中华鳖具有明显地促生长作用。绿原酸促进动物生长的作用机理可能是：1)绿原酸具有肾上腺素类似功能，可提高中枢神经系统的兴奋性以及胃肠道括约肌的收缩功能，促进动物对营养物质的吸收和利用；2)绿原酸具有广谱抗菌作用，使动物机体较好地抵御病原微生物的侵袭，保持良好的机能状态，有利于生长；3)绿原酸可能具有诱食作用 ；4)绿原酸可能诱导肝细胞产生IGF—I，促进腺体细胞的生长，增加生长激素分泌|1引。这些推测尚需试验论证。

已有研究表明，杜仲或其提取物对养殖鱼类肌肉的品质有明显影响。添加1％杜仲皮、1％杜仲汁均可显著地降低异育银鲫肌肉的失水率(P< 0．05)，提高羟脯氨酸含量(P杜仲皮<0．01，P杜仲汁< 0．05) ；添加0．15％ 杜仲叶提取物显著提高了异育银鲫肌肉粗蛋白质含量(P<0．05)，并有降低异育银鲫肌肉中粗脂肪含量的趋势(P>0．05)E73；在鲤鱼饲粮中添加6％ 的杜仲叶粉可提高肌肉中粗蛋白质含量24．1％ ，降低粗脂肪含量16．7％ (P< 0．05)。。；添加0．15％杜仲叶提取物，可显著提高草鱼肌肉粗蛋白质含量(P<0．05)，添加4％杜仲叶粉、0．10％和0．15％杜仲叶提取物均可提高草鱼肌肉胶原蛋白含量(P<0．05)l6]。据本试验，在饲粮中添加200和400 mg／kg绿原酸，极显著或显著提高了裙边和肌肉胶原蛋白含量(P裙边< 0．01， P肌肉<0．05)，添加400 mg／kg绿原酸显著提高了肌肉粗蛋白质含量(P<0．05)，与上述报道一致。各试验组体脂比和肌肉粗脂肪含量与对照组均无显著性差异(P>0．05)，说明绿原酸对中华鳖体的脂肪沉积无明显影响。

动物机体内存在一套完整有力的抗氧化系统，其中包括酶类和非酶类清除机制。酶类系统主要包括GSH—Px、SOD和CAT等。对超氧阴离子自由基、羟自由基、过氧化氢等的清除主要由SOD、 CAT、GSH—Px等酶促系统的活性增强来完成。

SOD能够歧化超氧阴离子自由基形成过氧化氢，过氧化氢通过GSH．Px和CAT分解成水和氧气，避免活性氧对细胞的伤害。GSH—Px还能使不饱和脂肪酸氧化产生ROOH 转化为相应的醇，从而阻止过氧化物对细胞的损害。绿原酸是一种有效的酚型抗氧化剂，能有效清除启动脂质过氧化的引发剂，从而起到抑制脂质过氧化的作用l1引。据本试验，在饲粮中添加200 mg／kg绿原酸显著地增强了GsH— Px、SOD 和CAT 的活性(PGsH < 0．05，PsoD< 0．01，PcAT<0．01)，添加400 mg／kg绿原酸也显著提高了GSH．Px和SoD 的活性(PGsHn< 0．01， P oD绿原酸可通过提高抗氧化酶活性来抑制脂质过氧化作用，从而增强机体的抗氧化能力。也有研究发现，1％杜仲叶、1％杜仲汁可显著提高异育银鲫血清SOD活性(P<0．05)；4％杜仲叶粉、0．15％杜仲纯粉、0．10％或0．15％杜仲叶提取物显著提高了草鱼血清s0D 活性(P< 0．05) 。杜仲或其提取物的抗氧化作用可能与其富含绿原酸密切相关。

4 结论

① 添加200 mg／kg绿原酸能显著促进中华鳖的生长。

② 添加200、400 mg／kg绿原酸能显著提高中华鳖裙边和肌肉胶原蛋白的含量，并显著降低肌肉胆固醇水平。

③ 添加200、400 mg／kg绿原酸能显著提高中华鳖的抗氧化能力。

④ 添加200~400 mg／kg绿原酸能增强中华鳖的抗氧化能力并改善其生产性能。 

杜仲提取物   绿原酸  金银花提取物  苦杏仁苷  枇杷叶提取物-熊果酸    大花紫薇提取物-科罗索酸

  淫羊藿苷  二氢杨梅素  獐牙菜苦苷

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