湖北民族学院附属医院

摘  要：目的分析恩施自治州所属中药材基地所产川大黄中大黄素含量。方法  采用薄层色谱法测定两个大黄生产基地所产大黄中大黄素含量。结果  样品色谱光斑与对照品相一致，干燥后减失重量均＜14.1%，总灰份均＜9.2%，酸不溶性灰份均＜7.1%，大黄素含量均＞0.2624%，结论 恩施地产大黄品质好，宜大面积生产。

关键词：大黄；薄层色谱法；大黄素；含量测定；恩施

大黄系多年生草本植物，是一种常用中药材，有清热、解毒、泻火、活血祛瘀等功效，临床常直接用于治疗湿热便秘、

积滞腹痛、泻痢不爽、目赤咽肿、瘀血经闭，跌打损伤、外治水火烫伤，同时，大黄还是多种中成药的主要配方原料，如美宝胶囊、复方大青叶片等都含有大黄药物成分。大黄根茎含葸醌衍生物的总量为1.01~5.19%，其中以结合状态的为主，游离状态仅占小部分。大黄的品种主要有雅黄和川大黄等，原主产于四川、陕西、贵州、云南等地，素有“华中药库”之称的湖北省恩施自治州生产大黄也有悠久历史，目前恩施州的大黄的种植面积就已超过15000亩， 2005年实际产量已达1066吨[1]。随着恩施市板桥镇万亩大黄基地项目的正式实施，其生产规模将进一步扩大。为掌握恩施地产大黄品质，笔者特对该地产大黄进行分析，检测酸水解后的五种主要游离蒽醌甙元之一——大黄素的含量。现将结果报告如下。

1  仪器与材料

1.1 样品：恩施州白果恩泰公司川大黄基地、巴东县绿葱坡大黄产业经济带等地所产的大黄(见图1)

图1:所提取样品的青苗
1.2 对照品：大黄素(emodin)中国药品生物制品检定所提供。
1.3 试剂：甲醇、乙醚、乙酸乙酯、石油醚、甲酸乙酯、甲酸、盐酸等（均为分析纯），硅胶GF254预制板(Merck)  (20×10cm)。
1.4 仪器  CAMAG全自动点样器(Automatic TLC Sampler Ⅲ，江苏昆山)、CAMAG双槽展开箱、CAMAG薄层扫描仪(SCANNER 3)、CAMAG薄层色谱摄像仪(REPROSTARⅡ，美国TSP公司，Spectra SERIES UV100紫外——可见检测器；KT-300V型超声波测定仪（山东济宁中冠超声波有限公司）。

2  测定方法
2.1 供试液制备
取白果基地与绿葱坡基地产样品粉末各0.5g，精密称定，加甲醇超声提取3次，每次20min，滤过，滤液蒸干，残渣加水l00ml溶解，加盐酸l0ml，置水浴上回流30 min，立即冷却，用乙醚提取3次，每次50ml，合并乙醚液，用水50ml洗涤，弃去水液，乙醚液小心挥干，残渣用乙酸乙酯溶解移至l0ml量瓶中，并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
2.2 对照品溶液制备
取大黄素对照品，加乙酸乙酯制成每1ml含0.2mg的溶液，作为对照品溶液，吸取对照品溶液4μl，点于硅胶GF254预制板(20×10cm)上，以石油醚(30～60℃)-甲酸乙酯-甲酸(15：5：1)的上层溶液为展开剂，展开约8cm，取出，晾干。
2.3 扫描测定
取供试液2份，编号分别为1#(白果基地样品)、2#(绿葱坡基地样品)，各装3份，与对照液S1、S2按S1 S2 a a a b b b Sl S2 a a a b b b顺序排列(S1：对照液低浓度，S2：对照液高浓度，a：供试液1#，b：供试液2#)。吸收扫描[波长：λs=440nm，扫描速度：20mm/s，扫描时间：3min(16个扫描道)]，在CAMAG全自动点样器(Automatic TLC Sampler Ⅲ)条带状点样，供试品色谱中，置紫外光灯(光源：钨灯，365nm)下检视，再置氨蒸气中熏后，在与对照药材色谱相应的位置上，日光下检视。
2.4 计算
以CAMAGCATS4.0扫描用计算机软件计算，直线回归，外标法两点校正,，积分时间：1 min (计算机自动积分) 回归方程为：Y1=17410.15+3646.64X1，γ=0.9991[2]。
3 测定结果
3.1 色谱
紫外光灯下斑点变为红色，显相同的六个橙黄色荧光主斑点（图2）；氨蒸气熏后，在与对照品色谱相应的位置上，日光下显六个相同的红色荧光斑点，未显持久的亮紫色荧光（图3）
   
                   图2： 365nm荧光色谱                              图3：氨熏后可见光色谱
3.2 大黄素含量测定
所取两份样品在 105℃干燥恒重后，减失重量分别为13.7%和14.1%，总灰份分别为8.9%和9.2%，酸不溶性灰份分别为7.1%和6.8%，均未超过《中国药典》所规定的干燥后减失重量＜15.0%，规定的总灰分＜10.0%，酸不溶性灰分＜0.8%。大黄素含量详见表1。

由表1知，两份样品含大黄素均远远超过《中国药典》规定的不少于0.05%。

4  结论
　　本实验笔者抽恩施州两个大黄主要生产基地——白果恩泰公司川大黄基地、巴东县绿葱坡大黄产业经济带的产品所取两份样品色谱光斑与对照品相一致，干燥后减失重量均＜14.1%，总灰份均＜9.2%，酸不溶性灰份均＜7.1%，大黄素含量均＞0.2624%，相关指标都达到《中国药典》规定标准，表明恩施地产大黄品质好，宜大面积生产。

参 考 文 献
[1] 恩施自治州统计局. 恩施州中药材生产情况调研报告[S].内部资料,2006.3:146
[2] 周祥敏,梁渝陵,母小东.HPLC法测定大黄素含量.天然产物研究与开发,2004.16( 5)：464-466
[3] 中国药学会.中国药典中药薄层色谱彩色图集[M].北京:人民卫生出版社,第三版,2005,6:22