陈洪英，袁振营，王富丽

(河南省宛西制药股份有限公司，西峡474550)

金芪降糖颗粒为国家四类新药，山金银花、黄连、黄苠等中药组成，功能清热益气，用轻、中型非胰岛素依赖型糖尿病。绿原酸为该方君药金银花清热解毒的主要成分。其含量测定已报道有紫外分光光度法[1]，脉冲极谱法[2]，薄层扫描[3]，HPLC法[4]由于复方中药制剂组分复杂，为了有效控制药品质量，采用HPL~法对该方有效成分绿原酸进行含量测定，获得满意效果。

1 仪器与药品

美国惠普HP110型高教液相色谱仪，HPI100系列单元泵，VWD紫外检测器，HF3395数据处理机，FAI104型电子天平，金芪降糖颗粒(本公司生产)，绿原酸对照品(中国药品生物制品检定所)，乙腈为色谱纯，水为去离子水，使用前超声处理．其他试剂均为分析纯。

2 方法与结果

2．1 色谱条件 色谱柱HYPERSIL ODS柱(4mm×250mm，10／um)流动相：乙腈-水-冰醋酸(10：100：2)；检测波长326nm；柱温40℃ ，流速1.0ml/min。在此条件下，样品中绿原酸与其它相关峰均能达到基线分离，保留时间约为14．1min，空白无干扰。

2．2 对照品溶液制备 精密称取绿原酸对照品适量，用甲醇溶解，制成0.1 rng/ml的溶液．即得。

2．3 供试品提取条件的确定 提取时间考察：取同批样品5份，各1g，精密称定，加甲醇50 rnl，分别超声处理10、20、30、40、50min，放冷，称重，用甲醇补足损失的重量，摇匀，用0.45um滤膜滤过、吸取续滤液5ul，注人色谱仪，按上述色谱条件测定绿原酸含最、结果不同提取时间绿原酸的含量分别为2.25、2.39、2.65、2.64、2.62m g/g。由此可知提取时间30min．能对绿原酸提取完全。提取溶剂用量选择：取同批样品5价．各1 g．精密称定，分别加甲醇30、40、50、60、70m1．超声处理30min，放冷，称量，用甲醇补足损失重量．同法测定绿原酸含量。结果不同溶剂用量所测绿原酸的含量分别为2．46、2 59、2 66、2．60、2．64mg／g。说明溶剂用量50ml能对绿原酸提取完全。

2．4 供试品溶液制备 精密称取本品lg．置50ml量瓶中，加甲醇至刻度，称量，超声处理30min，放冷、再用甲醇补充至刻度，摇匀，用0 45um滤膜过滤、弃去初滤液，取续滤液作为供试品溶液

2．5 标准曲线制备 分别精密吸取上述对照品溶液l、3、5、7、9ul，按上述色谱条件测定峰面积，以峰面积积分值为纵坐标，绿原酸对照品的 为横坐标，绘制标准曲线，其回归方程为r=3615440X+28696，r=0．9998。绿原酸在进样量0 103～0．927ug呈良好的线性关系。

2．6 精密度试验 吸取上述对照品溶液5 ul重复进样5次，结果RSD为0．86％ 证明精密度良好。

2．7 重现性试验取同批样品6份、分别按样品测试条件测定，结果RSD为2.03％。表明重现性良好。

2．8 样品测定分别精密吸取上述对照品溶液3.7ul，供试品溶液5ul，注人高效液相色谱仪，测定峰面积，以外标两点法求出绿原酸的含量。结果见表1.

2．9 回收率试验采用加样回收法，取已知含量的金芪降糖颗粒1 g，精密称定，分别添加绿原酸对照品，按样品制备方法及测试条件测定．结果见表2。

2．10 稳定性试验精密吸取对照品溶液5出，隔1h进样1次，共进样8次，测得绿原酸峰面积分值，计算RSD为1．27％，证明绿原酸在7h内稳定。

3 结论

采用反相HPIA2法测定金芪降糖颗粒中绿原酸的含量、方法简便、准确、灵敏，重现性好，回收率均符合要求，可作为该制剂的质量控制方珐。绿原酸的含量可能会因金银花产地不同而引起制剂中绿原酸含量的波动。关于这方面的工作有待进一步研究，故要控制金银花药材的来源，以保证成品质量

参考文献

[1] 林黎明差示导数光谱法测定金银花及银翘解毒片中总绿原酸含量[J]．中国中药杂志，1991，t6(5)：282

[2] 张秀琴总绿原酸的快速脉冲极谱测定洼[J]．药物分析杂志，l987，7(3)：l62

f3] 郝美玲消淋散中绿原酸的薄层含量分析[J’ 中成药，1997，l9(1)：48

[4] 黄两峰反相HPLC分离金银花成份世绿原酸含量测定：J：中草药，1998，t9(5)：14